RT Dissertation/Thesis
T1 Micropropagación de "Quercus suber L." y resistencia/tolerancia in vitro al patógeno "Phytophthora cinnamomi" Rands. fases iniciales de la micropropagación de Q. "ilex" L.
A1 García Martínez, Juan José
A2 Universidad de Huelva. Departamento de Ciencias Agroforestales, 
K1 Encinas
AB El espectacular descenso de la masa forestal de Quercíneas producido en la zonamediterránea desde el último tercio del siglo XX, ha levantado una enorme preocupaciónsobre la conservación de las dehesas y bosques de Quercus, de vital importancia en dichazona. Fruto de ello es que los numerosos estudios llevados a cabo, han permitido asociar avarios factores causales, de manera que actualemente se mantiene la hipótesis de que laacción combinada de estos factores, origina el deterioro progresivo y generalizado del árbolhasta causar su muerte, por lo que a esta enfermedad se le ha denominado como “eldecaimiento” de los Quercus, considerando al patógeno Phytophthora cinnamomi como elprincipal factor contribuyente de esta enfermedad. Uno de los recursos para actuar frente aésta, son los estudios de resistencia/tolerancia encaminados a la selección y propagación deindividuos élite, dentro de los cuales se enmarca el presente trabajo, centrado concretamenteen la selección y propagación de encinas (Q. ilex L., ssp. ballota) y alcornoques (Q. suber L.).La propagación se ha llevado a cabo mediante cultivo in vitro, ya que este método deregeneración permiten salvar los inconvenientes originados por las condiciones geográficas,climáticas y de tiempo de producción, gracias a que se realizan en condiciones ambientalesmuy controladas. En el primer capítulo, se ha abordado la micropropagación de materialadulto y juvenil, tanto de encinas como de alcornoques. En la fase de preparación del materialse observó un comportamiento diferente de ambas especies respecto al pre-tratamiento enfrío de estacas de material adulto, no siendo recomendable para encina y sí para alcornoque.En la fase de implantación, las formulaciones de medios de cultivo basadas en las sales GB5mostraron los mejores resultados en encina respecto a las GD o MS, mientras que enalcornoque, se impusieron las GD frente a las MS. En la fase de multiplicación, ya solo para elcaso de los alcornoques, los explantes cultivados con sales MS mostraron mejorcomportamiento que con sales GD. La mejor combinación de hormonas fue de 0,3mg/L deBAP + 2mg/L de AIB, resultando novedoso que los explantes presentaran mejor desarrollo yaspecto estando las auxinas en mayor proporción que las citoquininas. En la fase deenraizamiento, concentraciones de AIB superiores a 4mg/L, originaron problemas de necrosisapical, siendo esta causa muy dependiente del genotipo y origen del material. Porcentajes de hasta el 80% de brotes enraizados viables se lograron con el tratamiento de 4mg/L de AIBdurante 15 días. Ni el tratamiento previo en oscuridad, ni en medios libres de hormonas,lograron mejorar los porcentajes globales de enraizamiento, aunque en algunos clones comoel HEE-6 se llegó a alcanzar el 100% de brotes enraizados con el tratamiento en oscuridaddurante los 7 primeros días de la rizogénesis. No obstante, el tratamiento en medio libre dehormonas previamente a la inducción de la rizogénesis en medios con auxinas, logró disminuirlos porcentajes globales de la necrosis apical. En el segundo capítulo, se abordó la inoculaciónin vitro con Phytophthora cinnamomi de explantes de alcornoque y, la evaluación deparámetros representativos de la afección provocada por la infección en las plántulasinoculadas. Tras establecer la dosis de inóculo y el tiempo de inoculación adecuados para losensayos, se pudieron establecer qué parámetros del estado sanitario de las plantas podíanreflejar mejor los efectos de la infección tanto en la parte aérea como radical de las plántulasy, se compararon 5 clones de alcornoque por su diferente comportamiento frente a lainfección respecto a esos parámetros. Así, parámetros de la parte aérea como el “tiempo enalcanzar la necrosis total”, “tiempo en aparecer los primeros síntomas de necrosis”, “velocidaden alcanzar la necrosis total desde la aparición de los primeros síntomas” o la “valoraciónvisual del tallo” y, parámetros de la zona radical como el “porcentaje de longitud de raíznecrosada respecto a la longitud total”, “la tasa de crecimiento en longitud de las raíces” o la“tasa de crecimiento en número de las raíces”, actuaron como parámetros diferenciadoresentre genotipos de las plántulas enraizadas in vitro e inoculadas con Phytophthora cinnamomi.
AB The dramatic fall in Quercinea forests occurred in the Mediterranean area from the last thirdof the twentieth century, has generated great preoccupation about the “dehesa” and Quercusforest conservation, because its importance in that area. Numerous studies have allowedrelate the factors involved in the aforementioned fall, so the hypothesis remaining today isthat the combined action of these factors, leads to the progressive and widespreaddeterioration of the tree up to cause its death. That is why this disease was known as oaks"decline", considering the pathogen Phytophthora cinnamomi as the main contributor to thisdisease. One of the resources to respond to this problem, are the studies ofresistance/tolerance for selection and propagation of elite trees, within which is framed thepresent work, specifically focusing on the selection and propagation of holm oak (Q. ilex L. ,ssp. ballota) and cork oak (Q. suber L. ). The propagation has been carried out by in vitroculture, since this method of regeneration allows saving the disadvantages caused bygeographical and weather conditions, as well as time of production, in very controlledenvironmental conditions. The first chapter deals with micropropagation of adult and juvenilematerial were made, both of holm and cork oaks. In the initial phase of the material, adifferent behavior of both species was observed with respect to the cuttings pre-coldtreatment in adult material, not being recommended for holm oak but just for cork oak. In theestablishment phase, the culture media based on GB5 salts showed the best results in holmoak respect to GD or MS media, while GD rinsed better results than MS in cork oak. In theproliferation phase, only performed for cork oak, explants showed better aspect andmultiplication rates in MS in opposition to GD. The best hormones combination was 0,3mg/LBAP + 2mg/L AIB, being novelty the better aspect and development of the explants remainingthe auxins in greater proportions than cytokines. Rooting was performed only for cork oak too.Percentages of up to 80% of available rooted shoots were achieved with the treatment of4mg/L of AIB for 15 days. Neither the darkness pre-treatment, nor free-hormone mediatreatments, improved the overall percentages of rooting, although some clones as the HEE6reached 100% of available rooted shoots with darkness treatment during the first 7 days of rhizogenesis. Tips necrosis problems were cause by concentrations of AIB higher than 4mg/L,being this cause very dependent on the genotype and origin of the material. However,treatment in free-hormone media prior induction of rhizogenesis in auxins media, reduced theoverall percentages of the tip necrosis. In the second chapter, the in vitro inoculation with P.cinnamomi of in vitro rooted explants of cork oak was made, as well as the evaluation ofparameters representing the symptoms caused by infection in those plantlets. Dose ofinoculum, time of inoculation for the appropriate tests and the better parameters reflectingthe health state of the plants after infection in both the aerial and the radical part of plantletswere established. After that, 5 clones of cork oak were compared by its different behaviorafter infection with P. cinnamomi. Parameters as the "time to reach the total necrosis", "timeto appear the first symptoms of necrosis", "speed to reach the total necrosis from theemergence of the first symptoms" and the "visual rating of stem" of the aerial part, andparameters as the "percentage of necrotic root length compared to the total length", "the rateof growth in length of the roots" and the "rate of growth in the number of roots" of the rootzone, showed differences between genotypes of the in vitro rooted and inoculated plantlets.
PB Universidad de Huelva
YR 2016
FD 2016
LK http://hdl.handle.net/10272/12706
UL http://hdl.handle.net/10272/12706
LA spa
DS Repositorio Institucional de la Universidad de Huelva
RD 30 may 2026